Van Opstall studeerde fiscaal recht in Leiden, en ging daarna aan de slag als international belastingadviseur in de fusie- en overnamepraktijk van Andersen. Daarna stapte ze over naar Deloitte, waar Van Opstall zich meer met strategie en beleid ging bezighouden. In 2011 toog ze naar RebelGroup, een advies- en investeringsgroep waar ze naam maakte als specialist op het gebied van transitiemanagement en publiek private samenwerking.
In 2017 was Van Opstall projectleider Duurzame Binnenvaart bij de Provincie Zuid-Holland. En sinds 2018 is ze directeur van Smart Port. Met SmartPort beoogt Van Opstall allianties te smeden en wetenschappelijke kennis in te zetten om van Rotterdam de ‘beste en de slimste’ haven te maken. Smart Port is een samenwerkingsverband van het Havenbedrijf Rotterdam, Deltalinqs, Gemeente Rotterdam, Erasmus Universiteit en Technische Universiteit Delft, TNO, Deltares en Marin.
Elisabeth van Opstall is daarnaast bestuurslid bij de Pauluskerk en (W)arm Rotterdam omdat deze organisaties onvermoeid een robuuste schouder bieden aan mensen die dat nodig hebben. Ook is Van Opstall jurylid van Changemaker van de Week.